Indução de resistência em arroz contra Bipolaris oryzae Breda de Hann, através da expressão constitutiva de um gene de quitinase / Induction of resistance in rice against Bipolaris oryzae Breda de Hann by constitutive expression of achitinase gene

Este trabalho objetivou a transformação genética da cultivar de arroz BRS Taim, para obtenção de resistência ao fungo Bipolaris oryzae, agente da mancha parda. Para a transformação das plantas foi utilizada a cepa LBA 4404 de Agrobacterium tumefaciens transformada com o plasmídeo pMOG 22 que codifica o gene da quitinase do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae. Mesocótilos de arroz foram imersos por 30 min. em solução bacteriana (OD600 = 0,7), contendo acetoceringona (100 Mm). Após os explantes foram co-cultivados por 72 horas em meio MS sem hormônio. Para seleção dos transformantes foi utilizado meio MS com 5 mg L-1 de BAP e 15 mg L-1 de higromicina, incubados a 25±1°C, fotoperíodo de 16 horas e densidade de fluxo de fótons de 42 µmol m-2 s-1. Foram obtidas 5 plantas transformadas, perfazendo uma média de eficiência de transformação de 1,53 %. A resistência das plantas foi observada somente por um dos isolados. Os resultados permitem concluir que as plantas de arroz transformadas com o gene da quitinase(Chit 1)podem reduzir o desenvolvimento do fungo B. oryzae, porém existe uma diferença na reação entre isolados.

This study aimed at a rice transformation for resistance to Bipolaris oryzae causal organism of Brown Spot, the cultivar BRS Taim and the line LBA 4404 of Agrobacterium tumefaciens transformed with plasmid pMOG 22 that codifies the chitinasegene Metarhizium anisopliae was used. Rice mesocotils immersed for 30 min in bacterial solution of OD600 = 0,7 with acetoceringone (100Mm), were co-cultivated for 72 hours in MS medium free of hormones and with 100Mm of acetoceringone. Mesocotils were then transferred to MS with 5mg L-1 de BAP and15 mg L-1 of higromicin for 45 days at 25°C and 16 ligth hours. The five transformed plants obtained (1,53 transformation rate) were inoculated with two B. oryzae isolates.Resistance was observed only with one of the isolates. The results indicate that rice plants transformed with chitinase gene (Chit 1)can reduce the colonization by some isolates of B. oryzae.

Regional survey and identification of Bipolaris spp. associated with rice seeds in Rio Grande do Sul State, Brazil / Levantamento regional e identificação de Bipolaris spp. associadas às sementes de arroz no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil

In the harvest year of 2004, a random sample of seed lots (n=165) from six rice-growing regions of Rio Grande do Sul (RS) State, Brazil, were examined under seed health blotter test. Fungi growth resembling Bipolaris or Drechslera spp. was isolated and identified at the species level. Observations on the anamorphic structures (conidiophores and conidia) allowed separation of isolates into three groups. Pseudothecia, asci and ascospores from sexual crosses between isolates from a same anamorphic group but originated from different regions showed the typical characteristics of three recognized species (anamorph/teleomorph): Bipolaris cynodontis (Cochliobolus cynodontis); B. curvispora (C. melinidis) and B. oryzae (C. miyabeanus). All species were widely distributed across the rice-growing regions. Overall, the most prevalent species were B. oryzae (44.6 percent) and B. curvispora (42,9 percent) followed by B. cynodontis (24,1 percent). This is the first report of B. cynodontis associated with rice seeds in Brazil and the preliminary identification of B. curvispora in rice by the observation of the teleomorph phase was confirmed. The regional occurrence of a complex of pathogenic Bipolaris species related to brown spot epidemics in other countries, may have epidemiological consequences in the region which deserve further investigation.

Uma amostra aleatória (n=165) de lotes de sementes de seis regiões produtoras de arroz no Estado do Rio Grande do Sul (RS), Brasil, ano de colheita 2004, foi examinada em teste blotter de sanidade de sementes. Fungos semelhantes a espécies de Bipolaris e Drechslera foram isolados para identificação das espécies. A observação de estruturas da fase anamórfica (conidióforos e conídios) permitiu separar os isolados em três grupos. Cruzamentos sexuais induzidos em isolados do mesmo grupo, mas originados de diferentes regiões, resultaram em pseudotécio, ascos e ascósporos, permitindo a identificação de três espécies (anamorfo/teleomorfo): Bipolaris cynodontis (Cochliobolus cynodontis); B. curvispora (C. melinidis) e B. oryzae (C. miyabeanus). Todas as espécies estavam distribuídas nas seis regiões produtoras no Rio Grande do Sul. Em geral, a espécie mais prevalente nas amostras foi B. oryzae (44,6 por cento) e B. curvispora (42,9 por cento) seguido de B. cynodontis (24,1 por cento). Este é o primeiro relato de B. cynodontis associada a sementes de arroz no Brasil, e confirma-se a ocorrência de B. curvispora pela observação da fase teleomórfica. A ocorrência de um complexo de espécies patogênicas de Bipolaris, relacionadas com a mancha parda em outros países, pode ter consequências epidemiológicas na região, o que merece futura atenção.

Growth of symbiont fungi of some higher attine ants in mineral medium

Bioassays were conducted to verify the possibility of culturing the symbiont fungus of some higher attine in mineral medium and finding out the optimum pH value for their satisfactory mycelial growth. Three organic media and one mineral medium were inoculated with isolates from Atta sexdens piriventris and Acromyrmex heyeri. In mineral medium different values of pH (4.0, 5.0, 6.0 and 7.0) were tested with isolates from A. laevigata and A. laticeps. The behavior of isolates (colony diameter) was different in the mineral medium. However, even the one which grew the least of all provided enough mycelial for RAPD analysis. The best range of pH for fungal growth in mineral medium was between 4.0 and 5.0.